水式真空泵对蛋白过度磷酸化的分析！！！

    响应面设计法是可靠的实验设计及分析方法， 可通过过程的回归拟合计算出响应于各因素水平的 响应值，在提取试验中往往能够得到最优工艺参数， 是解决多变量问题的一种有效统计方法。根据单因素试验的结果，采用响应面法进一步 优化乙醇提取阿纳其根总黄酮的提取工艺，同时，基 于前期研究发现的其具有改善冈田酸( okadaic acid， OA) 对 PC12 细胞损伤的作用基础上。调温电热套( DZTW 型，北京市永光明医疗仪器 有限公司) ; 电子分析天平( SQP 型，德国赛多利斯) ; 恒温水浴锅( XMTD － 7000 型，北京市永光明医疗仪 器有 限 公 司) ; 酶 标 仪 ( Go 1510 型，美 国 Thermo Fisher) ; 旋转蒸发器( RE － 52AA 型上海亚荣生化仪 器厂) ; 循环水式多用真空泵( SHB － BA95 型，巩义 市英峪 予 华 仪 器 厂) ; 数控超声波清洗器 ( KQ － 250DE 型，昆山市超声仪器有限公司) ; 垂直电泳仪( 125 － BR 型，美国 Bio － Rad 公司) ; 凝胶成像系统 ( Gel Doc XR 型，美国 Bio － Rad 公司) ; 高速冷冻离 心机( Allegra 64R 型，德国 Benkman 公司) 。

    在提取时间为 60 ～ 100 min 范围内，随着提取时间延长，总黄酮得 率先提高后降低，于 2 h 时最高，故选取提取时间 1 ～ 3 h 进行响应面优化分析。在提 取次数为 1 ～ 4 次范围内，随着提取次数增加，总黄 酮得率先增大后减小，于提取 2 次时最大，故最终确 定最佳提取次数为 2 次。在乙醇浓 度为 60% ～ 90% 范围内，随着乙醇浓度升高，总黄酮 得率先增大后减小，乙醇浓度为 70% 时，总黄酮的提 取效果最好，故选择乙醇浓度 60% ～ 80% 进行响应 面优化分析。在提取温度为 60 ～ 100℃范围内，总黄酮得率呈现先升后降的趋势，于 提取温度为 80℃时达到最高，之后有所下降，故选取 提取温度为 70 ～ 90℃进行响应面优化分析。