用巩义予华DF-101S对包合物脂质分析

１ 实验部分 

１．１ 试剂与仪器 

雷公藤甲素原料药：质量分数９６．８％，西安汇 林生 物 科 技 有 限 公 司；雷公藤甲素对照品：批 号 Ｂ２０７０９，上海源叶生物科技有限公司；卵磷脂、胆 固醇：药用规 格，山 东 巨 荣 生 物 工 程 有 限 公 司；β－ ＣＤ，ＨＰ－β－ＣＤ：药用辅料，北京奥博星生物技术有 限责任 公 司；乙 醇：体 积 分 数 ９５％，１，２－丙 二 醇： 分析纯，天津永晟精细化工有限公司；甲醇：色谱 纯，无水乙醇、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠：分析纯， 天津市科密欧化学试剂有限公司；透析袋：６ｍｍ， 截留相对分子质量１４０００，上海源叶生物科技有限公司。 集热式恒温加热磁力搅拌器：ＤＦ－１０１Ｓ，巩义市予华仪器有限责任公司；紫外分光光度计：Ａｇｉ－ ｌｅｎｔ Ｔｅｃｈ．Ｃａｒｙ６０ＵＶ－Ｖｉｓ，高 效 液 相 色 谱 仪： ＡｇｉｌｅｎｔＴｅｃｈ．１２６０，美国安捷伦科技有限公司；台 式高速离心机：ＴＧ－１６５０－ＷＳ，上海卢湘仪离心机 仪器有限公 司；超 声 波 清 洗 机：ＳＢ－５２００ＤＴ，宁 波 新芝 生 物 科 技 股 份 有 限 公 司；电 子 天 平： ＢＴ１２５Ｄ，赛多斯科学仪器（北京）有限公司；马尔 文激光粒度仪：ＺＥＮ－３６００Ｍａｌｖｅｒｎ，英国马尔文仪 器有 限 公 司；恒 温 培 养 振 荡 器：ＺＨＷＹ－１００Ｂ，上 海智城分析仪器制造有限公司。

１．２ 实验方法

精密称取雷公藤甲素、卵磷脂和胆固醇适量， 置１００ｍＬ 烧 杯 中，加 入 １０ｍＬ 无 水 乙 醇，超 声 （２００Ｗ，８０ｋＨｚ）溶解后备用；搅拌（１００ｒ／ｍｉｎ）条 件下将１２ｍＬ磷酸盐缓冲溶液（ＰＢＳ）（ｐＨ＝７．４， 后同）缓慢注入上述溶液中，继续搅拌２０ｍｉｎ，取 出，超声（２００Ｗ，８０ｋＨｚ）处 理２ｍｉｎ，离 心（离 心 力７１７２×ｇ）１５ｍｉｎ，取沉淀另器保存，即得雷公 藤甲素普通脂质体。精密称取卵磷脂和胆固醇适量，置 １００ｍＬ 烧杯中，加 入 １０ｍＬ 无 水 乙 醇，超 声（２００ Ｗ，８０ ｋＨｚ）溶解后备用；取上述雷公藤甲素β－ＣＤ 包 合 物适量，加 １２ｍＬ ＰＢＳ 溶 液 溶 解，搅 拌 （１００ｒ／ ｍｉｎ）条件下缓慢注入上述卵磷脂、胆固醇无水乙 醇溶液中，继 续 搅 拌２０ｍｉｎ，取 出，超 声（２００Ｗ， ８０ｋＨｚ）处 理 ２ ｍｉｎ，离 心 （离 心 力 ７１７２×ｇ） １５ｍｉｎ，取沉淀 另 器 保 存，即 得 雷 公 藤 甲 素β－ＣＤ 包合物脂质体。

２ 结果与讨论

供试品溶液中雷公藤甲素的色 谱峰与杂质峰之间能得到很好的分离，且辅料对 主药的测定无干扰，方法专属性良好。以雷公藤 甲素质 量 浓 度（ρ）为 横 坐 标，峰 面 积（Ａ）为 纵 坐 标，进 行 线 性 回 归 得 回 归 方 程：ｙ＝２５３８２ｘ－ ９．２０１６，ｒ＝０．９９９９，说明ρ（雷公藤甲素）＝６．６４～ ７９．６８ｍｇ／ｍＬ线性关系良好。雷 公 藤 甲 素 普 通 脂 质体在３种释放介质中的释药速度相当；ｔ＝１～ ８ｈ，释 药 速 率 有 差 异，排 序 为 ＰＢＳ 溶 液 ＞φ（乙 醇）＝２０％生理盐水＞φ（乙醇）＝４０％生理盐水； ｔ＝８～２４ｈ，释 药 速 率 较 慢，基 本 趋 于 平 稳；２４ｈ 内的累积释药率均约为７０％。雷公藤甲素β－ＣＤ 包合物脂质体在３种释放介质中的释药速率和各 时间点的累积释药率排序均为φ（乙醇）＝２０％生 理盐 水＞φ（乙 醇）＝４０％生 理 盐 水＞ＰＢＳ溶 液，２４ｈ 内 的 累 积 释 药 率 分 别 约 为 ８０％、７０％ 和 ６０％。雷公藤 甲 素 ＨＰ－β－ＣＤ 包 合 物 脂 质 体 在 ３ 种释放介质中的释药速率和各时间点的累积释药 率都相当，无显著差异，且２４ｈ内的累 积 释 药 率 均约为９０％。由此可见，同一种脂质体在不同释 放介质中的释放曲线不尽相同，有时差异还很大。

３ 结 论 

将雷公藤甲素分别用β－ＣＤ 和 ＨＰ－β－ＣＤ 包合后再包封于脂质体的内水相形成包合物脂质 体，与制备的雷公藤甲素普通脂质体通过体外释 药实验进行对比分析，发现（１）同一种脂质体在不 同释放介质中的释药曲线会有差异，不同类型脂 质体在同一种释放介质中的释药曲线也不一样； （２）与普通脂质体相比，β－ＣＤ 包合物脂 质 体 具 有 明显的持续缓释作用，而 ＨＰ－β－ＣＤ包合物脂质体 释药初期具有缓释作用，中期释药加速，后期又趋 缓；β－ＣＤ包合物 脂 质 体 和 ＨＰ－β－ＣＤ 包 合 物 脂 质 体释药行为差异的主要原因是不同包合材料的溶 解度和空间位阻效应不同；（３）雷公藤甲素 ＨＰ－β－ ＣＤ包合 物 脂 质 体 的 释 药 最 为 充 分，２４ｈ内 的 累 积释药率达９０．０％，其原因是 ＨＰ－β－ＣＤ具有良好 的水溶性。

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