用巩义予华DH-101S对富血小板血浆壳聚糖分析

1 材料与方法

壳聚糖 (低分子量级) 购于美国 ALDRICH 公司；蚕茧购于杭州润蚨蚕丝制品有限公司；冰 醋酸 (分析纯级) 购于科龙化工有限公司；氯化 钙 (分析纯级) 与无水乙醇 (分析纯级) 购于西 陇化工有限公司；戊巴比妥钠购于美国 Sigma 公 司；SPF 级雄性 SD 大鼠 15 只，体重 220–250 g， 实验动物由四川省实验动物专业委员会养殖场 (许可证号：SCXK[川]2015-030) 提供，在中国 医学科学院输血研究所动物实验室进行饲养及实 验，实验符合动物伦理学要求。全自动血细胞分析仪 (深圳迈瑞生物医疗电 子股份有限公司，型号 BC-3000)、磁力搅拌器 (巩义市予华仪器有限公司，型号 DH-101S)、真空冷 冻干燥机 (德国 Christ 公司，型号 ALPHAl-4 LSC plus)、扫描电子显微镜 (荷兰 FEI 公司，型号Quanta 250)、电子天平 (常熟市双杰测试仪器厂， 型号 JJ223BC)、酶标仪 (美国 Biotek 公司，型号： Eon)、离心机 (美国 Thermo Scientific 公司，型号： SORVALL)。

浓缩血小板由德阳血站提供符合国家献血标 准的健康献血者，按《血站技术操作规程》采 集全血 400 mL，采用富血小板血浆法制备浓缩血 小板 (PC，每袋 60–70 mL)，质量均符合《全血 及成分血质量要求》 (GB 18469-2012)。每例 PC 取 20 mL 在 3 000 r/min 条件下离心 10 min， 取上层清液作为贫血小板血浆 (PPP)，根据全自 动细胞计数仪测定的结果将 PC 用 PPP 调节至血 小板浓度为 500×109 个/L，制备得到富血小板血 浆 (PRP)。将 0.1 mol/L 的 CaCl2 溶液按照 1∶10 (V/V) 的比例加入到 PRP 中，激活 PRP。

2 结果与分析

敷料表面的微结构 (如孔隙率、孔隙分布等)会影响材料吸收伤口血量以及 PRP 中生长因 子的释放速度。敷料的吸水性能与支架的亲水性紧密相关， 属于止血材料的物理特性之一。当材料按压在伤 口上时，吸水性强的材料会吸收血液中的水分， 导致血液黏度增加从而促进血小板聚集，实现血 液凝固。

3 结论

在纯壳聚糖敷料中加入 PRP 后虽不会明显改 善敷料的孔隙结构与吸水性，但体外全血凝血实 验与大鼠体内止血实验结果均显示会提高壳聚糖 敷料的止血性能。在 PRP 壳聚糖敷料中继续引入 丝素蛋白，并且在壳聚糖溶液与丝素蛋白溶液的 体积配比为 1∶1 时，敷料具有致密的孔隙结构与 较高的吸水性，体外全血凝血实验与大鼠体内止 血实验也证明此比例敷料与其余几组敷料相比， 具有更好的止血性。

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