大豆分离蛋白提取（巩义予华SHZ-D(Ⅲ)使用）

大豆分离蛋白 （SP）I 属于全价蛋白，其资源极其丰富，营养较为全面，而且具有溶解性、分散性、起泡性等特殊性能。SPI 中普遍含有一种抗营养因子——植酸，植酸会和 SPI 包括一些酶结合形成植酸蛋白质复合物，从而影响蛋白质的生理功能。当4.5<pH 值 <9.0 时，带负电荷的蛋白质、金属阳离子与带负电荷的植酸形成难溶的复合物，影响人体对蛋白质与矿物质的吸收，并且植酸的存在对 SPI 的溶解性、分散性、起泡性也有一定影响。

1 材料与方法 

1.1 主要原料与试剂 

低温脱脂豆粕，山东万德福实业集团提供。 氢氧化钠、盐酸、浓硫酸、丙酮，国药集团化学 试剂有限公司提供；无水乙醇，安徽安特食品股份 有 限 公 司 提 供 ； 植 酸 钠 ， Sigma； D001、 D201、 D301、D152 型树脂，安徽三星树脂厂提供。

1.2 主要仪器

HH-S 型恒温水浴锅，江苏国盛实验仪器厂产 品；SHZ-D(Ⅲ)型循环水式真空泵，巩义市予华仪器有限公司产品；T 系列电子天平，上海越平科学仪器 有限公司产品；UV-5100H 型紫外可见分光光度计， 上海元析仪器有限公司产品；20 mm×200 mm 离子 交换柱，安徽千玻教学仪器有限公司产品；HL-2 型 恒流泵、BSZ-160 型自动部分收集器，上海沪西分 析仪器厂产品；pHS-3C 型 pH 计，上海仪电科学仪 器股份有限公司产品。

1.3 大豆分离蛋白的提取试验

低温脱脂豆粕→碱溶→离心→酸沉→离心→洗 涤、过滤沉淀→烘干得 SPI。（1） 原料。将豆粕稍加烘干，除去结块后备用。 （2） 碱溶。向豆粕中加入适量水，调 pH 值至碱 性条件，在一定温度下搅拌 50 min，溶解其中蛋白质。 （3） 离心。在 4 ℃条件下以转速 4 000 r/min 离 心 15 min，弃去沉淀。 （4） 酸沉。将上清液 pH 值调至酸性条件，摇 匀，室温下静置 30 min。 （5） 离心。在 4 ℃条件下以转速 4 000 r/min 离 心 15 min，去除上清液。 （6） 洗涤、过滤沉淀。用蒸馏水洗涤沉淀并抽 滤，直至滤液 pH 值为中性。 （7） 烘干。将得到的 SPI 凝乳放入烘箱中烘干， 粉碎，粉状物即为 SPI。

2 结果与分析

在料液比为 1∶6~1∶10 时， SPI 提取率逐渐上升，在 1∶10 之后逐渐下降。料液 比升高时，酸沉提取过程使蛋白乳清中溶解的球蛋 白变多，随之丢失的蛋白也变多，SPI 的提取率就会 降低。故选择碱溶最佳料液比为 1∶10。pH 值为 8~10 时 SPI 的提取 率越来越高，pH 值为 10~12 时逐渐减小。这可能是 因为当 pH 值变大时蛋白分子的表面电荷变多，溶解 的蛋白质增加，提取的 SPI 也随之增多，然而 pH 值 过高会使蛋白质变性，降低了 SPI 提取率。因此， 选择最佳 pH 值为 10。

3 结论 

在单因素试验基础上，利用正交试验优化得出 大豆分离蛋白的最佳提取工艺为碱溶浸提液料液比 1∶10，碱溶 pH 值 9，碱溶温度 50 ℃，此时 SPI 提 取率达 79.01%。D201，D001，D301 和 D152 这 4 种 树脂对植酸的脱除效果不同，结果表明 D201 型树脂 对植酸的脱除效果最好。脱除植酸后，SPI 的溶解 度、分散性、起泡能力和泡沫稳定性都有变化，其中，溶解度降低，分散性稍有增加，起泡能力提高 而泡沫稳定性有所下降。研究得出了一些对提取低 植酸含量的 SPI 有参考和借鉴价值的参数和结论， 总体上提高了 SPI 的营养价值。

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