蒙药苏格木勒汤含量测定(巩义予华超声波使用

1 材料 

1.1 仪器 

U3000型HPLC仪，包括二极管阵列检测器、四元梯 度泵（美国Thermo Fisher公司）；AL204型电子分析天平 （美国Mettler-Toledo公司）；KQ-250型超声波清洗机（巩义予华仪器有限责任公司）；GC-2014AFSC型GC仪，包 括自动进样器、氢火焰离子化检测器[岛津企业管理（中 国）有限公司]。 

1.2 药品与试剂 

芹菜素对照品（批号：111901-201603，纯度：99.2％）、 胡椒碱对照品（批号：110775-201405，纯度：98.9％）、桉 油精对照品（批号：110788-201707，纯度：100％）均由中 国食品药品检定研究院提供；枯茗醛对照品[安倍尔实 验室技术（上海）有限公司，批号：R4030004，纯度：95％]； 正己烷为分析纯，甲醇及其余试剂均为色谱纯，水为蒸 馏水。 

1.3 药材 

白豆蔻（批号：冀 20100139）、香旱芹（批号：冀 20100139）、荜茇（批号：冀20100139）均购于内蒙古田里 药材公司，经内蒙古医科大学蒙医药学院图门巴雅尔教 授 鉴 定 分 别 为 姜 科 植 物 白 豆 蔻（Amomum kravanh Pierre ex Gagnep）和爪哇白豆蔻（A. compactum Soland. ex Maton）的果实、伞形科植物孜然芹（Cuminum cyminum L.）的成熟果实、胡椒科植物荜茇（Piper longum L．） 的干燥未成熟或成熟果穗。

2 方法与结果

色 谱 柱 ：Agilent Eclipse XDB- C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-0.1％磷酸水溶 液；流速：1.0 mL/min；进样量：10 μL；柱温：30 ℃；检测 波长：225 nm（芹菜素）、342 nm（胡椒碱）。取芹菜素、胡椒碱对照 品各适量，精密称定，加甲醇制成含芹菜素、胡椒碱质量 浓度分别为0.200、1.397 mg/mL的混合对照品溶液。取上述混合对照品溶液、供试 品溶液、空白对照溶液各10 μL，按“2.1.2”项下色谱条件 进样测定，记录色谱，详见图1。由图1可知，在混合对 照品溶液和供试品溶液色谱图上有相同保留时间的色 谱峰，理论板数按芹菜素、胡椒碱计均不低于 3 000，各 成分分离度均大于1.5，空白对照对测定无干扰。取“2.1.3”项下混合对照品溶液 适量，用甲醇依次稀释 1、2、4、8、16 倍后分别精密吸取 10 μL，按“2.1.2”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。 以质量浓度（x，μg/mL）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标进 行线性回归，得芹菜素回归方程为 y＝673.24x+1.212 1 （r＝0.999 6），胡椒碱回归方程为 y＝1 145.2x+9.370 5 （r＝0.999 9）。结果表明，芹菜素、胡椒碱分别在12.5～ 200、87.3～139.7 μg/mL范围内线性关系良好。

3 讨论 

在前期预试验中，笔者对芹菜素、胡椒碱在 200～400 nm波长范围内进行二极管阵列检测，结果显示，芹 菜素、胡椒碱分别在225、342 nm波长处有最大吸收峰， 故选择225、342 nm分别进行检测。本课题组前期分别 以甲醇、乙醇、甲醇-25％盐酸溶液为溶剂制备苏格木勒3汤水提物供试品溶液，结果显示，以甲醇-25％盐酸溶 液为溶剂时能很好地保护醛基，故选择其作为溶剂；同 时又考察了超声提取和回流提取对提取效果的影响，结 果发现，超声提取时提取率高、时间短、温度低，有效成 分易于分离、纯化；此外，还比较了甲醇-水、甲醇-0.1％ 磷酸水溶液、乙腈-水等不同流动相系统的分离效果，结 果显示，以甲醇-0.1％磷酸水为流动相时，各待测成分与 其他成分可达到基线分离，且出峰快、保留时间短、色谱 峰峰形理想、分离度好，故选择其作为流动相。

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