磁力搅拌器用于大鼠体内药物分析

    对于急慢性肝 炎、早期肝硬化、中毒性肝炎、脂肪肝、药物中毒性肝损伤及 酒精性肝损害有较好的疗效。本实验建立了快速、灵敏的 高效液相色谱法测定大鼠血浆中水飞蓟宾浓度，对水飞蓟 宾原料药和市售利加隆? 、水林佳? 胶囊在大鼠体内的药物 动力学进行研究，为水飞蓟宾相关药物的开发提供思路。岛津高效液相色谱仪 ＬＣ－２０１０Ａ（日本岛津公司）；ＸＨ－ Ｃ漩涡混合器（金坛市白塔新宝仪器厂）；ＴＧＬ－１６Ｇ 高速离 心机（上海安亭科学仪器厂）；ＭＴＮ－２８００Ｄ 氮吹 浓缩装 置 （天津奥特赛恩斯仪器有限公司）；ＨＨ－２Ｋ４四孔恒温水浴 锅（巩义市予华仪器有限责任公司）；ＤＦ－１０１Ｓ集热式恒温 加热磁力搅拌器（巩义市予华仪器有限责任公司）；ＦＡ１００４ 精密电子天平（天津天马衡基仪器有限公司）。

    取低、中、高 ３ 种不同浓度的质控溶液（２００ｎｇ／ｍＬ、５ ０００ｎｇ／ｍＬ、８００００ｎｇ／ｍＬ），不加酶溶液和甲醇，按“２．３”项 下方法处理，进样分析，每个浓度制备３份样品，分别考察 水飞蓟宾血浆样品室温放置２ｈ、处理后４℃放置２４ｈ、冻融 循环１次、冻融循环３次、－２０℃放置３０ｄ的稳定性。由于水飞蓟宾在血液中大部分以葡糖醛 酸结合 型存 在，游离型含量很低，为了更准确地考察水飞蓟宾在大鼠体 内的生物利用度，实验采用酶解法，测定血浆中水飞蓟宾 总含量。采用 ＳＩＧＭＡβ－葡糖醛酸糖苷酶（β－Ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄａｓｅ） 溶液对血浆样品进行预处理，在确定血浆样品的处理方法 过程中，比 较 了 β－葡 糖 醛 酸 糖 苷 酶 活 性 （１００Ｕ／１００ｍＬ、 ２００Ｕ／１００ｍＬ、５００Ｕ／１００ｍＬ、１０００Ｕ１００／ｍＬ）及孵化时间 （１ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ、８ｈ、１２ｈ）对血药浓度的影响，最终确定酶解 条件为β－葡糖醛酸糖苷酶活性１０００Ｕ／１００ｍＬ，３７℃水浴孵 化８ｈ。